質粒是獨立于染色體的環狀DNA分子。在分子生物學中，他們被用作運送分子，或稱載體，用于承載特定的DNA片段。

利用細菌來復制質粒，可以大規模生產目的DNA。從細菌中獲得質粒的方法稱為質粒純化。

質粒純化是將質粒DNA與基因組DNA、蛋白質、核糖體以及細菌細胞壁分離開的一種技術。

質粒純化包括三個基本步驟：細菌的培養，細菌的收集和裂解，質粒DNA的純化。

實驗材料：含質粒的大腸桿菌

試劑、試劑盒：葡萄糖 EDTA Tris-HCl NaOH SDS KAc 異戊醇

儀器、耗材： 臺式高速離心機 、 恒溫振蕩搖床  、高壓滅菌鍋  、振蕩器 、 微量移液器 、 1.5ml離心管 （點擊藍色字體可查看相關產品）

實驗步驟

純化完成后，有許多方法可用來檢驗質粒的純度，以確認質粒沒有被基因組DNA污染并且沒有在細菌內被修飾。

分光光度計可以通過比較在不同波長條件下的吸光度來測定質粒DNA的濃度。（點擊藍色字體可查看相關產品）

瓊脂糖凝膠電泳也可用來分析質粒DNA的大小是否正確或者是否有雜質。（點擊藍色字體可查看相關產品）

應用和改動

對于不同的質粒大小、拷貝數、和培養體積，可相應改動該質粒純化過程，包括使用不同的結合，清洗和洗脫設備。其中最主要的區分標準是質粒產量，它將質粒制備劃分為微量提取，中量提取，大量提取和超量提取。

關于下游的應用，質粒純化后通常會被用于一種叫做轉染的技術，它是將質粒DNA轉入到真核細胞當中。多數時候，轉染的目的是利用報告蛋白來觀察細胞或組織的結構。

有時，分別純化的多個質粒會被轉入到同一細菌當中，這些質粒編碼幾種酶，從而在細菌中再造形成一個完整的生物合成途徑。最終結果是合成一種復雜的化合物，例如抗生素。

純化的質粒也可能用來重新轉化細菌，用于大量生產該質粒編碼的蛋白質。然后結晶純化的蛋白來進行結構分析。

參考資料：

《醫學生物化學與分子生物學實驗技術雙語教程》和《微生物學實驗》