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Applied Biosystems實時熒光定量PCR儀

7500 Fast快速實時熒光定量PCR儀

Applied Biosystems 7500 Fast實時熒光定量PCR儀具有5色熒光檢測通道和96孔快速升降溫模塊。支持常規單重(Singleplex qPCR)、多重熒光定量分析(Multiplexing qPCR)和快速PCR檢測。本欄目提供了其技術詳情、配置和IQ/OQ服務套餐方案。

設備名稱:實時熒光定量PCR儀 qPCR儀 real-time PCR system

制 造 商:美國Thermo Fisher公司      原產地:新加坡

品    牌:Applied Biosystems(AB)

型    號:7500 Fast(96×0.1mL)

技術詳情:見[技術規格]

商品報價:見[訂貨指南]

主要功能用途

7500 Fast實時熒光定量PCR儀具有5色熒光檢測通道和96孔快速升降溫模塊。支持常規單重(Singleplex qPCR)、多重熒光定量分析(Multiplexing qPCR)和快速PCR檢測。

主要應用包括:

1、基因表達分析

動植物和微生物在生理病理、環境及外來脅迫下相關基因表達的變化分析以及SiRNA誘導基因沉默和基因敲除后特定基因表達水平的檢測。

2、miRNA表達水平的檢測

基于miRNA與特定靶基因mRNA表達水平變化間的關聯,研究miRNA 調控基因表達機制。

3、基因分型(SNP genotyping)

利用TaqMan探針、飽和DNA染料HRM曲線分析進行基因分型,得出等位基因頻率、基因型占總基因型比率等。可應用于如遺傳病診斷,SNP基因分型,藥物代謝酶DME基因分型,法醫遺傳學鑒定等。

4、拷貝數變異(CNV)

拷貝數變異(Copy number variation, CNV)是指因基因組發生重排而導致長度1KB以上的基因片段的缺失(減少)、插入、重復(增加)、重排、倒 位、DNA 拷貝數目變化,也稱為拷貝數多態性(copy number polymorphisms, CNPs)。是造成物種個體差異和人類許多疾病(如癌癥、遺傳性疾病、心血管疾病)的一種重要遺傳基礎。熒光實時定量PCR檢測初始樣品的某個DNA 片段的拷貝數進行定量,用已知拷貝數為2的DNA內參校正而實現對目DNA 片段拷貝數的確認。

5、高分辨率溶解曲線分析(High resolution melt, HRM)

DNA序列長度、GC 含量及堿基互補性差異影響DNA雙鏈結構的熱穩定性。高分辨熔解曲線(high-resolution melt,HRM) 分析是通過實時監測升溫過程中與雙鏈DNA特異性結合的熒光染料釋放的綠色熒光強度的變化,了解PCR 產物中DNA分子的解鏈溫度情況,分析樣品特定基因片段DNA組成變化。實時熒光定量PCR實驗運行程序中引入溶解曲線分析環節后,可借助于專用HRM分析模塊完成HRM分析。HRM用于突變掃描和基因分型,不受突變堿基位點和種類限制,既可對未知突變進行篩查、掃描,又能對已知突變進行分析,還可用于STR分析。

6、病原體檢測(Pathogen detection)

實時熒光定量PCR儀能可靠用于臨床醫學人體上呼吸道的感染、肺炎、消化道感染、中樞神經系統等疾病,以及畜牧業、農作物病蟲害的病原體的檢測確認、感染嚴重程度的量化評估。

7、蛋白熱穩定性分析(Protein thermal shift)

利用實時定量PCR儀來分析熱穩定性,進行配體-蛋白結合的高通量篩選,突變或修飾對蛋白熱穩定性的影響

使用蛋白結合染料(如Protein Thermal Shift 染料),實時定量PCR系統上運行實時熔解實驗,根據因蛋白熔解導致熒光圖像差異,分析配體與蛋白的結合穩定性。可用于以高通量篩選配體與蛋白的結合, 篩選能與蛋白靶點結合的小分子和片段文庫候選藥物、抗體,鑒定最佳緩沖液條件以改善蛋白的純化和分離等。

8、食品安全和GMO(genetically modified organism)檢測

實時熒光定量PCR技術用于食品的微生物污染監測、肉食類食品食材來源和組成的檢驗、如轉基因動植物基因的檢測等。

9、耐藥基因檢測 

 

性能特點

7500 Fast實時熒光定量PCR儀采用的快速加熱塊,可在極速運行時保證熱均一性。快速變溫循環方式,可在短短30分鐘內得到高質量實驗結果;

1、5色熒光檢測通道完美支持多重實時定量分析

7500 Fast系統配置有熒光激發濾片、檢測濾片優化固定組合的5個熒光檢測通道,經出廠校準的染料包括:FAM/SYBR Green I、VIC/JOE、NED/ TAMRA/Cy3、ROX/Texas Red 和 Cy5 染料,能夠在單個反應孔中同時進行多個靶標的同步檢測。 

2、支持快速反應檢測

7500 Fast實時熒光定量PCR儀使用獨特設計的熱循環模塊,可在極速運行時保證反應模塊溫度的均一性。

配合TaqMan Fast Universal PCR Master Mix和Fast SYBGreen Master Mix預混液和快速光學反應板,在不影響擴增延伸階段時間和實驗擴增效能情況下,快速變溫速率完成規定實驗程序。快速光學反應板可確保在 10–30 uL 反應體積下獲得與標準常量實時熒光定量PCR反應一致的檢測精度,而更快速得到實驗結果。

快速熱循環技術,最短可在30分鐘內完成一次運行。 

3、高分辨率熔解曲線分析。

Applied Biosystems熔解曲線分析軟件(High Resolution Melting Analysis,HRM)軟件,易于使用,可通過HRM分析實現更精確的突變篩查和基因分型分析。 

4、21 CFR Part 11合規管理功能

21 CFR Part 11合規管理軟件,內含安全、審計、電子簽名套件,實現運行和數據的合規,可滿足實驗管理符合美國聯邦法規第21章第11節 (21 CFR Part 11)的規定。 

5、AB提供IQ/OQ/IPV驗證支持解決方案

經驗證的AB工程師可幫助執行Installation Qualification(IQ)/Operational Qualification(OQ)和Iinstrument Performance Verification(IPV)流程操作。

主要技術規格

7500 Fast實時熒光定量PCR儀主要技術規格參數見下表。

技術要素

規格參數

PCR反應模塊性能

樣品通量

96孔×0.1 mL

反應體積

10~30μL

支持的耗材

0.1mL 96孔反應板與光學蓋膜

0.1 mL96孔反應板與光學平蓋

0.1 mL 8連管與光學平蓋

0.1 mL單管與光學平蓋

熱循環控溫類型

Peltier-Based System

最大模塊變溫速率

5.5℃?sec

最大樣品變溫速率

快速模式± 3.5℃?sec;

標準模式± 1.6℃?sec

溫度準確度

設定值/顯示溫度±0.5℃ (35℃至95℃范圍時鐘啟動后3分鐘開始測量)

溫度均一性

±1℃(35℃至95℃范圍時鐘啟動后30秒測量)

PCR完成運行時間

<30分鐘運行

光學檢測模塊性能

激發光源

OptiFlex Blue LED光源

激發/檢測波長范圍

450–600   nm/500–640 nm

熒光檢測通道

5個熒光通道(激發/發射濾光片5對)

熒光激發波長

CH1:470±15nm

CH2:520±10nm

CH3:550±10nm

CH4:580±10nm

CH5:640±10nm

熒光檢測波長

CH1:520±15nm,適用于FAM/SYBR Green(預校準);SYT09

CH2:558±12nm,適用于VIC(預校準);HEX, TET, and JOE

CH3:587±10nm,適用于ABY/NED/TAMRA(預校準);Cy3

CH4:623±14nm,適用于JUN/ROX(預校準);Texas Red

CH5:682±14nm,適用于Cy5/MUSTANG PURPLE(預校準);LIZ

多重分析能力

最多5個靶點

動態范圍

9個數量級的線性動態范圍

靈敏度

可在30μL反應中單重TaqMan分析檢測1拷貝RNaseP模板

精密度

可分辯5000至10000個RNaseP模板拷貝(2倍),置信度997%

運行時間

快速PCR模式:完成40個循環的反應<40分鐘

標準PCR模式:完成40個循環的反應<2小時

 

安裝運行條件

7500 Fast實時熒光定量PCR儀在海拔2km以下室內使用

工作環境溫度:15℃ ~ 30℃(推薦)

工作電源:100-240V/50-60Hz/10A;960 W

相對濕度范圍:20 ~  80%R.H.

主機重量:34 kg

外觀尺寸尺寸(W×D×H):340×450×490 mm

組成配置

7500 Fast實時熒光定量PCR儀工作配置包括7500 Fast主機、軟件包(含Primer Express Software)、聯機電腦工作站、工作線纜、PCR啟動工具包及備件。

標配附件包括:

1)工作線纜套件(包括聯機數據線Universal USB Cable、電源電纜power cable, 網線Ethernet cable);

2)PCR Starter Kit(含Splash-free Support Base、MicroAmp Optical 96-Well Fast Thermal Cycling Plate with Barcode、MicroAmp Optical Adhesive Film和Adhesive Film Applicator);

3)儀器運行校驗工具包(含Chemistry/Calibration Kits、TaqMan RNase P Chemistry Fast Verification Plate、7500 Fast Spectral Calibration Kits和7500 Fast systems TaqMan Fast Reagent Starter Kit);

4)備用件配套工具。 

可選配附件包塊SDS 7500 Fast 21CFR11數據審計軟件模塊和無線網卡。

品名

品牌

貨號

規格

中文描述

單價

USB WiFi Module

Applied Biosystems

A26774

each

High-Power USB Wi-Fi Module,

Maximum speed up to 300 Mbps.

Use with SimpliAmp ProFlex, QuantStudio 1/3/5.

詢價

21 CFR Part 11 Module

Applied Biosystems

4377355

1 set

21 CFR Part 11 Software Module

 for the 7500 Systems

詢價

 

基本耗材

7500 Fast實時熒光定量PCR儀配置的是96×0.1 mL快速反應模塊。適用于快速熒光定量PCR管、PCR聯排管或PCR板。
為使得反應管、反應板與反應模塊的緊密貼合、熱傳導效率均勻一致,建議采用通過Applied Biosystems儀器兼容性測試的 MicroAmp系列,以確保獲得精確、可重復的PCR實驗結果

品名

品牌

貨號

規格

描述

報價

96孔快速熒光定量PCR板

Applied Biosystems

4346907

10板/盒

MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well

Fast Reaction Plate, 0.1 mL

詢價

快速定量PCR板彩色組合裝

Applied Biosystems

4483493

5板/盒

MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Fast

Multicolor Reaction Plates with Barcode

詢價

快速熒光定量PCR單管

Applied Biosystems

4358297

1000   支/盒

MicroAmp Fast Reaction Tube with Flat Cap,

Clear, 0.1 mL

詢價

快速PCR 8聯管

Applied Biosystems

4358293

125條/盒

MicroAmp Fast 8-Tube Strip, 0.1 mL

詢價

定量PCR封板膜

Applied Biosystems

4360954

25張/盒

MicroAmp Optical   Adhesive Film

詢價

定量PCR 8聯平蓋

Applied Biosystems

4323032

300條/盒

MicroAmp Optical 8-Cap Strips,Flat , Clear

詢價

 

 

訂貨指南

Applied Biosystems 7500 Fast實時熒光定量PCR儀提供實時熒光定量PCR儀提供無電腦工作站、帶臺式電腦或便攜式電腦工作站三種配置套裝。電腦工作站預裝有StepOne Software、Primer Express Software應用軟件。

序號

品名

貨號

套裝配置描述

報價

1-1

7500 Fast實時熒光定量PCR儀

4381530

Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System

Includes:

7500 Fast qPCR Instrument Main Unit

PCR Starter Kit

Universal USB Cable

power cable

Ethernet cable

詢價

詢價

1-2

7500 Fast實時熒光定量PCR儀

工作套餐

4351106

Applied Biosystems 7500 Fast 96-well Real-Time PCR System

Includes:

7500 Fast 96-well qPCR System (4381530)

Dell tower computer

詢價

詢價

1-3

7500 Fast實時熒光定量PCR儀

工作套餐

4351107

Applied Biosystems 7500 Fast 96-well Real-Time PCR System

Includes:

7500 Fast 96-well qPCR System (4381530)

Dell laptop computer

詢價

詢價

 

對于有GLP、FDA、CFDA管理合規要求的實驗,Applied Biosystems為7500 Fast實時熒光定量PCR儀提供了2Q驗證服務套餐。

序號

品名

貨號

套裝配置描述

報價

2-1

IPV服務包7500 FAST

4365571

IPV,SERVICE 7500 FAST

詢價

2-2

IQ/OQ服務包7500 FAST

4365572

IQOQ,SERVICE 7500 FAST

詢價

2-3

IQ/OQ服務包7500 FAST DX

4415033

IQOQ,SERVICE 7500 FAST DX

詢價

 

Applied Biosystems為7500 Fast實時熒光定量PCR儀提供質保期限延長服務套裝(Extended warranty packages)。延保服務套裝內容包括高級體驗培訓服務(SmartStart Orientation)、廠家技術人員的定期上門現場儀器維護(AB Assurance Plan with 1 planned maintenance, PM)。

序號

品名

貨號

套裝配置描述

報價

3-1

7500 Fast 0PM延保套餐

ZG60SC7500FAST

EXT WARRANTY, 7500FAST, 0PM

詢價

3-2

7500 Fast 1PM延保套餐

ZG61SC7500FAST

EXT WARR, 7500 Fast, 1PM

詢價